Praćenje nevidljivih: Identifikacija somatskih kolifaga u svim vrstama voda
download PFD
ALS EnviroMail 18 Praćenje nevidljivih: Identifikacija somatskih kolifaga u svim vrstama voda
Uzimajući u obzir sve veće zahtjeve za valitetom pitke vode i društveni pritisak za ponovnu upotrebu pročišćene otpadne vode, somatski kolifagi se prate kao novi pokazatelji za procjenu efikasnosti procesa pročišćavanja i prečišćavanja vode. Stoga je vrlo važno pratiti njihovo prisustvo u određenim vrstama vode, posebno vode namijenjene za ljudsku upotrebu.
Uvod
Somatski bakteriofagi trenutno su značajna tema u području kontrole kvalitete vode jer pokazuju određene morfološke sličnosti s ljudskim enteričnim virusima i mogu poslužiti kao potencijalni indikatorski organizmi za virusnu kontaminaciju u vodi.
Somatski bakteriofagi su virusi koji inficiraju bakterije poput Escherichia coli i stoga su idealni indikatori fekalne kontaminacije u vodi. Iako somatski bakteriofagi nisu patogeni za ljude, oni prosperiraju u istim uvjetima i pokazuju vrlo slično ponašanje kao virusi koji su opasni po ljude. Ovi patogeni, takođvani enterični virusi, mogu kod ljudi uzrokovati vrlo neprijetne infekcijske bolesti probavnog sustava. Stoga, ako se u analiziranoj vodi otkriju somatski bakteriofagi, postoji velika vjerojatnoća da su u vodi prisutni i patogeni virusi.
Legislativa
Direktiva Europskog parlamenta i Vijeća (EU) 2020/2184 od 16. prosinca 2020. o kvaliteti vode za ljudsku upotrebu stupila je na snagu 12. siječnja 2021., što predstavlja potpuno preoblikovanu izmjenu Direktive 98/83/EC. Provedba ove direktive u nacionalno zakonodavstvo bila je planirana za kraj 2022./2023. godine.
Somatske koliforme bakterije se spominju i u Uredbi 2020/741 Europskog parlamenta i Vijeća (EU) od 25. svibnja 2020. o minimalnim zahtjevima za ponovnu upotrebu vode, koja bi trebala državama članicama pružiti relativno jednostavna pravila za ponovnu upotrebu tretirane vode iz urbanih sredina.
Procjena uzgoja: Određivanje jedinica plaka (jedinica PFU – Jedinica stvaranja plaka)
Metodologija za određivanje somatskih koligrafa
Budući da su somatski kolifagi virusi, analiza vode se provodi na potpuno drugačiji način u odnosu na određivanje bakterijskih parametara.
Analiza je vrlo složena i sastoji se od nekoliko uzastopnih koraka, gdje je potrebno pridržavati se točnog vremenskog okvira i specifičnih uvjeta.
Najbolje prakse uzorkovanja i transporta
- Validirane matrice: pitka, sirova, u bocama, površinska, podzemna, procesna i otpadna voda.
- Upotreba odgovarajuće boce za uzorkovanje: za analizu kolifaga, koristi se bijela plastična posuda od 500 ml napunjena natrijum-tiosulfatom (ovo neutralizira klor iz vodovodnih cijevi, sprječavajući umiranje i faga osjetljivih na prisutnost klora i time izbjegava izvještavanje lažno-negativnih rezultata).
Minimalna količina uzorka:
- 200 ml ispitivane vode.
- Transport uzorka u laboratorij: Za vrijeme transporta uzorka u laboratorij mora se osigurati usklađenost s odgovarajućim uvjetima: hlađenje uzorka od 4 do 8°C.
- Holding Time: Analiza se mora obaviti u roku od tri dana (72 sata) od uzorkovanja. Iz tog razloga, uzorci se moraju dostaviti u laboratorij najkasnije do četvrtka ujutro u navedenom tjednu.
Zašto je ispitivanje bakteriofaga bitno?
Kolifagi igraju ključnu ulogu kao indikator kvalitete vode. Njihovo prisustvo može signalizirati potencijalne rizike po javno zdravlje, kao što je prisustvo enteričkih virusa i bakterija.
Praćenje somatskih kolifaga služi kao efikasan sistem ranog upozorenja na fekalnu kontaminaciju u vodosnabdjevanju. Kada se otkriju veće razine ovih virusa, to pokreće daljnje ispitivanja i intervencije, čime se pomaže u sprečavanju bolesti prenosivih vodom. Osim toga, praćenje razina somatskih koligrafa j neophodno za procjenu učinkovitosti procesa tretmana vode, uključujući dezinfekciju i filtraciju, čime se osigurava kvalitet vode.
Osiguranje usklađenosti sa propisima i standardima za higijensku ispravnost pitke i tople vode još je jedan ključni aspekt zaštite javnog zdravlja. Istraživanje somatskih koligrafa i njihovog ponašanja u okolišu doprinosi epidemiološkim skrining aktivnostima. Takvo istraživanje pruža vrijedne informacije o praćenju bolesti prenosivih vodom i može pomoći u strategijama prevencije bolesti. Razumijevanje obrazaca i ponašanja koligrafa u različitim uvjetima okoliša poboljšava našu sposobnost predviđanja i ublažavanja potencijalnih izbijanja bolesti.
Procjena uzgoja: Određivanje jedinica plaka (jedinica PFU – Jedinica stvaranja plaka)
(A) Optimalni broj jedinica plaka za brojanje i evaluaciju.
B) Granična broja plakovih jedinica koje se mogu prebrojati i evaluirati. Potrebno je daljnje razrjeđivanje uzorka, a metoda filtracije membranom nije prikladna.
(C) Uzorak je previše kontaminiran za brojanje i evaluaciju plak jedinica. Prekrivene ploče se odbacuju i uzorak mora biti razrijeđen prije sljedeće analize. Metoda filtracije membrane nije prikladna.
Reference
- Kolifazi kao virusni indikatori sanitarne važnosti za vodu za piće. Frontiers in Microbiology (2022), 13 DOI 10.3389/fmicb.2022.941532
- Zuzakova J., Janak D., Rihova Ambrozova J.: Concentration and enumeration methods of somatic coliphages in water samples. Vodohospodarske technicko-ekonomicke informace (2021), 63 (1), 3-13. DOI 10.46555/VTEI.2020.11.002
- Jofre J., Lucena F., Blanch A.R., Muniesa M.: Coliphagi kao modelni organizmi u karakterizaciji i upravljanju vodenim resursima. Voda (2016), 8, 199. DOI10.3390/w8050199